實用的豬人工授精實驗室操作規程
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1、配制0.9% 鹽(yan)水
稱9克氯化(hua)鈉放(fang)入鹽水(shui)瓶,加蒸(zheng)(zheng)餾水(shui)達(da)1000ml,緊塞(sai)瓶口后(hou),放(fang)進蒸(zheng)(zheng)鍋消毒(du),開水(shui)蒸(zheng)(zheng)煮30分鐘,冷卻后(hou)即可(ke)使(shi)用(yong)(yong)。0.9%等滲(shen)(shen)生(sheng)理(li)鹽水(shui)是用(yong)(yong)來(lai)清洗各類與(yu)精液直(zhi)接接觸的器皿。此鹽水(shui)的濃度與(yu)精液滲(shen)(shen)透壓相近(jin),不會引起精蟲(chong)的死亡(wang),如用(yong)(yong)蒸(zheng)(zheng)餾水(shui),將使(shi)精蟲(chong)致(zhi)死。
2、玫瑰紅(hong)染色液配制
稱3克玫(mei)瑰紅,加(jia)入99ml蒸(zheng)餾水,用玻璃棒攪勻后(hou),再加(jia)1ml40%福爾馬(ma)林(lin)。此稀(xi)釋劑用于(yu)(yu)對精(jing)蟲進(jin)行染色(se),以便于(yu)(yu)檢查異常的精(jing)子。
3、稀釋液配制
精(jing)(jing)液(ye)稀釋液(ye)是與新鮮精(jing)(jing)液(ye)滲透壓接近,用(yong)于擴(kuo)大精(jing)(jing)液(ye)容(rong)量,給精(jing)(jing)子(zi)提(ti)供營(ying)養、中和精(jing)(jing)子(zi)代謝產物、保持(chi)精(jing)(jing)液(ye)PH值的生理溶液(ye)。
4、采精量測定
按照規范(fan)的(de)(de)(de)采(cai)精(jing)操作,公豬(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)采(cai)精(jing)量一般(ban)在100~500ml,平均220ml。每(mei)頭公豬(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)采(cai)精(jing)量應(ying)相對比較(jiao)穩定(ding)。如(ru)果公豬(zhu)(zhu)的(de)(de)(de)采(cai)精(jing)量超出正常范(fan)圍, 或與以往采(cai)精(jing)量明顯(xian)不同,應(ying)注意(yi)查(cha)找原因(yin)。公豬(zhu)(zhu)精(jing)液的(de)(de)(de)比重約為(wei)1.02克(ke)/ml,接近于1,因(yin)此,適(shi)合(he)用稱重的(de)(de)(de)方(fang)法來測量采(cai)精(jing)量。每(mei)克(ke)重量精(jing)液的(de)(de)(de)體(ti)積(ji)約為(wei)1ml。
5、精液稀釋與保存
(1) 精液的(de)稀釋
精液(ye)(ye)(ye)(ye)稀(xi)釋(shi)時,一(yi)(yi)定要強調(diao)原精液(ye)(ye)(ye)(ye)與(yu)稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)的溫(wen)度要盡量一(yi)(yi)致,溫(wen)度相差在(zai)2℃以內(nei)。根(gen)據計(ji)算所得的稀(xi)釋(shi)后總(zong)精液(ye)(ye)(ye)(ye)體(ti)積,緩緩加(jia)入稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye),稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)加(jia)入應(ying)沿著杯壁倒入,禁止將稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)從高處倒入,形成(cheng)沖擊力。稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)的最終加(jia)入量應(ying)使精液(ye)(ye)(ye)(ye)和(he)稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)的總(zong)體(ti)積達到所計(ji)算的稀(xi)釋(shi)后體(ti)積(或(huo)重量)。加(jia)入稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye)過程中(zhong),應(ying)一(yi)(yi)邊(bian)加(jia)入稀(xi)釋(shi)液(ye)(ye)(ye)(ye),一(yi)(yi)邊(bian)輕輕搖動(dong)燒杯或(huo)用潔凈的玻璃(li)棒(bang)攪拌。
(2) 精液的分裝
精(jing)(jing)液稀(xi)釋5分(fen)鐘(zhong)后,應再一(yi)次檢查精(jing)(jing)子活(huo)力,如果活(huo)力沒(mei)有下降,方可進(jin)行(xing)分(fen)裝(zhuang)。調好精(jing)(jing)液分(fen)裝(zhuang)機,以每80~100ml為單(dan)位,將精(jing)(jing)液分(fen)裝(zhuang)至精(jing)(jing)液瓶或袋。實驗室室溫(wen)最好控(kong)制在20~25℃,以免(mian)在精(jing)(jing)液稀(xi)釋分(fen)裝(zhuang)處理過程中(zhong)(zhong), 精(jing)(jing)液受到環境溫(wen)度的影響。空氣(qi)中(zhong)(zhong)的氧(yang)氣(qi)不(bu)利于精(jing)(jing)子的保存,因此,精(jing)(jing)液封裝(zhuang)時(shi)應盡可能將其中(zhong)(zhong)存留的空氣(qi)排出。
精液(ye)(ye)瓶(ping)在擰(ning)上蓋(gai)子(zi)時,先將瓶(ping)蓋(gai)旋大半圈左右,然后擠壓(ya)瓶(ping)體使精液(ye)(ye)液(ye)(ye)面上升(sheng)至(zhi)瓶(ping)口(kou),再旋緊,以排出瓶(ping)中(zhong)空(kong)氣。袋裝精液(ye)(ye)在封(feng)口(kou)時,也應先將其中(zhong)的空(kong)氣擠壓(ya),使精液(ye)(ye)面上升(sheng)到接近封(feng)口(kou)處的高度,再用(yong)熱(re)封(feng)口(kou)機熱(re)封(feng)。
(3) 精液的保存
A、保(bao)存溫度:稀釋好的(de)精液應(ying)保(bao)存在有報警裝置(zhi)的(de)電(dian)子恒(heng)溫箱中,恒(heng)溫箱內(nei)溫度保(bao)持在16~18℃;
B、每隔(ge)12個小時輕輕翻動一(yi)次,防止精子沉淀而引起(qi)死(si)亡;
C、稀釋的(de)精液可在保溫箱(xiang)內保存約(yue)3天(tian)。超過3天(tian)的(de)精液,質(zhi)量將開始下降,不能用于人工授精;
D、輸精(jing)前作精(jing)液(ye)檢查:向試管(guan)倒入1~2ml精(jing)液(ye),把試管(guan)放在37~38℃的(de)(de)恒溫(wen)水浴箱(xiang)中加溫(wen)5分(fen)鐘(zhong),取出(chu)精(jing)液(ye)輕輕搖勻,用(yong)(yong)已滅(mie)菌的(de)(de)滴(di)管(guan)取1滴(di)放于預熱的(de)(de)載(zai)玻片,置(zhi)于37℃的(de)(de)恒溫(wen)板上(shang)片刻,用(yong)(yong)顯微鏡檢查活力(li),精(jing)液(ye)活力(li)≥ 0.7,方可(ke)使用(yong)(yong)。
6、精液的運輸
精液運(yun)輸應(ying)置于(yu)保溫箱內,保持(chi)在16~18℃,運(yun)輸過(guo)程中避免(mian)強(qiang)烈震動。
主營產(chan)品:漏糞板(ban)模具
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